Molekuláris Biológiai Laboratórium | Bőrklinika

Molekuláris Biológiai Laboratórium

Technikák


PCR (polimeráz láncreakció)

Sejtkultúrákból illetve szövetekből trizol reagenssel RNS-t izolálunk, amelyet reverz transzkriptázzal átírunk cDNS-sé. A vizsgálandó génre specifikus primerekkel és próbákkal valós idejű polimeráz láncreakcióval határozzuk meg az adott mRNS mennyiségét (kvantitatív real-time PCR). Egyes esetekben hagyományos szemikvantitatív módszerrel végzünk mennyiségi összehasonlításokat (hagyományos PCR). Primer tervezés: hagyományos PCR amplifikációhoz felhasznált génspecifikus, rövid oligonukleotid fragmentek tervezése.

Gél-elektroforézis

Szemikvantitatív PCR-reakciók és genomikai DNS-en történő PCR amplifikációk termékeinek detektálása agaróz gélen, dokumentálás, denzitometrálás.

in vitro DNS technikák

DNS fragmentek beépítése vektorokba, felszaporításuk kompetens E. coli sejtekben. Tranziens transzfekció és stabil transzformáció humán sejtekbe illetve sejtvonalakba.

Genomikai vizsgálatok

Kérdőívek készítése betegadatok dokumentálásához, vérminták és bőrminták gyűjtése különböző betegcsoportoktól, genomikai vizsgálatok PCR-RFLP, Assay-On-Demand, Assay-by-Design kitekkel és szekvenálási módszerekkel. Az alábbi betegségek genetikai hátterét vizsgáljuk: porphyriák, acne vulgaris, acne inversa, melanoma, atópiás dermatitis, vitiligo, lábszárfekély, valamint szénanátha.

Enzym-linked immunosorbent assay (ELISA)

Sejtek által termelt anyagok (pl. növekedési faktorok, citokinek) a sejttenyészetek felülúszójából, illetve szérumból történő kimutatására használjuk.

Western blot

Sejtekben ill. azok felszínén lévő fehérjék kimutatására szolgáló érzékeny módszer, amely antigén-antitest kötődési reakción alapul.